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 大腸菌群和三種致病菌檢測(cè)試劑盒  使用說(shuō)明書(shū)

1.適用范圍：適用于各類(lèi)食品、純凈水等樣品中大腸菌群數(shù)檢測(cè)，致病菌（沙門(mén)氏菌、志賀菌、金黃色葡萄球菌）的快速篩查或進(jìn)一步檢測(cè)。

2.方法原理：與國(guó)標(biāo)法相同。事先將濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)基、亞（空白）硒酸鹽胱氨酸增菌液、GN增菌液、7.5%氯化鈉培養(yǎng)基、包被在試劑盒中，隨時(shí)取用。

3.試劑盒的組成：試劑盒由三個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基管（孔）（1、2、3）、七個(gè)小發(fā)酵培養(yǎng)基管（孔）（4、5、6、7、8、9、10）和三個(gè)致病菌增菌培養(yǎng)基管（孔）（A、B、C）組成。1-10孔包被濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)基，設(shè)有集氣窗代替倒管觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況。A孔包被濃縮亞（空白）硒酸鹽胱氨酸增菌液、B孔包被濃縮GN增菌液、C孔包被濃縮7.5%氯化鈉培養(yǎng)基。A孔為沙門(mén)菌增菌，B孔為志賀菌增菌，C孔為金黃色葡萄球菌增菌。

4.操作方法：

4.1 樣品處理：按《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)》GB/T4789.3.4.5.10-2003。

4.2 加樣：將試劑盒放在臺(tái)面上，打開(kāi)盒蓋，用無(wú)菌吸管吸取3個(gè)1：10稀釋液10mL分別加入試劑盒3個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)，用無(wú)菌吸管吸取3個(gè)1mL分別加入試劑盒3小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用無(wú)菌吸管取1：10稀釋后的樣品1mL注入到9mL滅菌生理鹽水中（1：100）取此管3個(gè)1mL稀釋液加入到試劑盒另3個(gè)小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用無(wú)菌吸管吸取稀釋后的樣品3個(gè)4mL分別加入致病菌增菌管（孔）（A、B、C）孔內(nèi)。

4.3 排氣泡: 加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在，可將試劑盒以30～45度角傾斜，（圖1）必要時(shí)可輕輕用力在桌面敲擊數(shù)下即可排出集氣窗內(nèi)氣泡。

4.4 培養(yǎng)：將加樣后的試劑盒置36℃± 1℃溫箱中，培養(yǎng)18～24h。

4.5 觀察結(jié)果：樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣，既產(chǎn)酸產(chǎn)氣的樣品為陽(yáng)性結(jié)果，見(jiàn)圖2、圖3。根據(jù)試劑盒的陽(yáng)性管數(shù)，參照國(guó)標(biāo)GB/T4789.3-2003的方法查MPN檢索表報(bào)告結(jié)果。如致病菌增菌培養(yǎng)基管（孔）有渾濁現(xiàn)象時(shí)，即預(yù)示著有對(duì)應(yīng)致病菌的存在，可將渾濁樣液接種對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基按GB/T4789.4.5.10進(jìn)一步檢測(cè)。

5. 注意事項(xiàng)：

5.1加入樣品后不需搖勻，平拿平放。

5.2 加樣時(shí)可用一次性無(wú)菌塑料吸管，將樣品稀釋液加至試劑盒所標(biāo)刻度處。

5.3 在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)應(yīng)平托出來(lái)，不要傾斜以免由于試劑盒的傾斜將陽(yáng)性管集氣窗中的氣泡排出而影響結(jié)果。

5.4 試劑盒為一次性無(wú)菌用品，供一次性使用。